ForeDirect RT-qPCR-sett
Kitbeskrivelse:
◮For RNA direkte sanntidsamplifisering fra vattpinnesamlinger uten RNA-renseprosesser.Dette settet fullfører qRT-PCR-syklusene innen én time.Enzymblandingen er en optimalisert blanding av omvendt transkriptase, Hot-Start Taq DNA-polymerase, RNase-hemmer.Reaksjonsbufferen inneholder alle nødvendige komponenter, inkludert optimaliserte bufferkomponenter, Mg2+, dUTP og dNTP-er.
Beskrivelse
ForeDirect RT-qPCR Kit er designet for RNA direkte sanntidsamplifisering fra vattpinnesamlinger uten RNA-renseprosesser.Dette settet fullfører qRT-PCR-syklusene innen én time.Enzymblandingen er en optimalisert blanding av omvendt transkriptase, Hot-Start Taq DNA-polymerase, RNase-hemmer.Reaksjonsbufferen inneholder alle nødvendige komponenter, inkludert optimaliserte bufferkomponenter, Mg2+, dUTP og dNTP-er.
Spesifikasjoner
100T
Komponenter i sett
| Nukleinsyrefrigjøringsmiddel |
| RNA-beskyttende |
| 2× RT-qPCR-buffer |
| Enzymblanding (Taq&M-MLV) |
| Bruksanvisning |
PCR-applikasjon
1. Når PCR-reaksjonsrørene har blitt sentrifugert kort, plasser dem i prøvetanken til amplifikasjonsinstrumentet.
2. Termisk protokoll
| Steg | Temperatur | Tid | Sykluser | |
| 1 | Omvendt transkripsjon | 50 ℃ | 15 minutter | 1 |
| 2 | Pre-denaturering | 95 ℃ | 1 minutt | 1 |
| 3 | Denaturering | 95 ℃ | 10 sekunder | 42 |
| 4 | Annealing/Forlengelse | 60 ℃ | 30 sekunder | |
Merk:Fluorescerende signal ble oppdaget umiddelbart etter forlengelsestrinnet i hver syklus.
3. Etter innstillingen lagrer du filen og kjører reaksjonsprogrammet.
Driftstrinn
Før reagensklargjøring bør alle reagensene i settet tines ved romtemperatur og blandes forsiktig.
Klargjøring av reagens
1. Klargjør nukleinsyrefrigjøringsblandingen
| Komponent | Volum per prøve eller kontroll |
| Nukleinsyrefrigjøringsmiddel | 5 μL |
| RNA-beskyttende | 0,5 μL |
2. Forbered reaksjonsblandingen
| Komponent | Volum per prøve eller kontroll |
| 2× RT-qPCR-buffer | 15 μL |
| Enzymblanding (Taq&M-MLV) | 1,5 μL |
| Primere og sonder | 1μL |
Lagring og holdbarhet
-Sitet bør oppbevares ved -20± 5℃.Gyldighetsperioden er 12 måneder.
-Unngå gjentatte fryse-tine-sykluser (<5 sykluser).
