Direkte RT-qPCR-sett
Kitbeskrivelse:
◮ Direct RT-qPCR Kit, ved hjelp av Foreasy Reverse Transcriptase og Foreasy HS Taq DNA Polymerase utviklet av Foregene, med unik reaksjonsbuffer, gjør dette settet med sterk motstand og kompatibilitet, og det kan teste reaksjonen direkte ved å bruke Foregene Lysis-system som mal.Dette settet kan gjelde for utvikling av nukleinsyredeteksjonssett for covid-19 og andre patogene bakterier.
Beskrivelse
Direct RT-qPCR Kit gir separat pakket RT-qPCR-buffer og høyeffektivt enzymblanding (Taq, M-MLV, RI), noe som gjør det praktisk for å lage back-end-sett og systemjustering, innen enkel verifisering.
Spesifikasjoner
500T, 50.000T
Komponenter i sett
| Settets innhold (20 μL reaksjonssystem) | IM-05111-01 | IM-05112-01 |
| 500 T | 50 000 T | |
| Direkte enzymblanding | 500 μL×1 | 50 ml×1 |
| 2× Direkte RT-qPCR-buffer | 1 ml× 5 | 500 ml×1 |
| Instruksjon | 1 | 1 |
Driftstrinn
Før reagensklargjøring bør alle reagensene i settet tines ved romtemperatur og blandes forsiktig.
A: Forberede of mal og reagens
1. Forbered forberedt RNA-mal (det anbefales å bruke Foregene Total RNA Isolation Kit-serien for å ekstrahere og rense RNA-mal) eller prøveknekkingsprodukt (det anbefales å bruke Foregene Lysis-system), spesifikke primere (10 μM) og andre relevante forbruksvarer, instrument.
2. Sett inn 2× Direct RT-qPCR-buffer, RNase-Free ddH2O og 20× ROX Reference Dye (hvis den'er nødvendig) i boksen med is, slik at disse smelter naturlig og blandes forsiktig.
B: Forberede of RT-qPCR system
Bord 1 : Forberede of RT-qPCR ssystem
| Komponent | Volum | Sluttkonsentrasjon |
| 2× Direkte RT-qPCR-buffer | 10 μL | 1× |
| Direkte enzymblanding | 1μL | |
| Forover Primer (10 μM) | 0,8 μL | 50-900nM |
| Reverse Primer (10 μM) | 0,8 μL | 50-900nM |
| Probe (4 μM) | 1μL | 200nM |
| Mal (RNA eller lysat) | X μL | |
| 20×ROX Reference Dye | - | 1* |
| RNase-FreeddH2O | (6,4-X) μL | |
| Totalt volum | 20μL |
C: Sett de RT-qPCR reaksjon program
Bord 2 : RT-qPCR reagereron program innstilling (til eksempel: to-steg metode)
| Steg | Temperatur | Tid | Sykluser | Innhold | |
| 1 | 50 ℃ | 15 min | 1* | 1 | Omvendt transkripsjon |
| 2 | 95 ℃ | 1 minutt | 1 | Pre-denaturering | |
| 3 | 95 ℃ | 10 sek | 40-45 | Denaturering | |
| 60 ℃ | 30 sek 2* | Annealing/Forlengelse | |||
Lagring og holdbarhet
-Sitet bør oppbevares ved -20± 5℃.Gyldighetsperioden er 12 måneder.
-Unngå gjentatte fryse-tine-sykluser (<5 sykluser).
