• facebook
  • linkedin
  • youtube
English
side_banner

Foreasy HS Taq DNA-polymerase

Foreasy HS Taq DNA Polymerase Utvalgt bilde
  • Foreasy HS Taq DNA-polymerase

Kitbeskrivelse:

◮Høy spesifisitet: Enzymet med høy varmstartaktivitet.

◮Rask forsterkning: 10 sek/kb.

◮Høy maltilpasningsevne: kan brukes til å effektivt forsterke HighGCverdiogforskjellige DNA-maler som er vanskelige å forsterke.

◮Sterk troskap: Troskapen er 6 gangerof vanlig Taq Enzyme.

foregen styrke


Produkt detalj

Produktetiketter

FAQ

Beskrivelse

Foreasy HS Taq DNA Polymerase er et nytt Taq-enzym uttrykt i Escherichia coli-bakterier ved hjelp av genrekombinasjonsteknologi.Etter at enzymet er behandlet med en spesiell prosess, er det's aktivitet hemmes før termisk aktivering, og inhiberer derved den ikke-spesifikke amplifikasjonen forårsaket av den ikke-spesifikke annealing av primere eller primer-dimerer under lave temperaturforhold.Dette produktet er egnet for svært spesifikk PCR Reaction, Multippel x PCR , høyt GC-innhold (> 60 %) ,medsekundær struktureller andresterk bakgrunnsgenomicsamplifikasjon og storskala genomicsforsterkningsdeteksjon.Enzymet har 5' → 3' DNA-polymeraseaktivitet og 5' → 3' eksonukleaseaktivitet, men ingen 3' → 5' eksonukleaseaktivitet.

Komponenter i sett

Komponent IM-01021 IM-01022 IM-01023
Foreasy HS Taq DNA-polymerase (5 U/μL)  5000 U (1 mL)  50 KU (10 mL)  500 KU (100 ml)
2× Taq-reaksjonsbuffer  25 ml × 5  250 ml × 5  500 ml × 25

Egenskaper og fordeler

- Høy spesifisitet: Enzymet med høy varmstartaktivitet.

- Rask forsterkning: 10 sek/kb.

- Høy maltilpasningsevne: kan brukes til å forsterke høy effektivtGCverdiogforskjellige DNA-maler som er vanskelige å forsterke.

- Sterk troskap: Troskapen er 6 gangerof vanlig Taq Enzyme.

Påføring av sett

- Diverse PCR/qPCR System og direkte PCR system

- PCR Amplified DNA Fragment

- DNA-merke

- DNA-sekvensering

- PCR pluss A hale

Aktivitetsdefinisjon

1U: Mengden enzym som kreves for å inkorporere 10 nmol avDNAtil syre-uløselig materiale ved å bruke aktivert laksesæd-DNA som mal/primer, 74 °C, 30 minutter.

Reaksjonstilstand

Temperatur Reaksjonstid Syklus tid
37°C 5 min 1
94°C 5 min 1
94°C 10 sek  40
60°C 10 sek

Merk:For 10 µL og 20 µL systemer, tilsett et likt volum mineralolje hvis den termiske sykluseren ikke har et varmelokk.

PCR-reaksjonsbetingelser varierer avhengig av strukturbetingelsene til maler, primere og lignende.I den spesifikke operasjonen er det nødvendig å designe de optimale reaksjonsbetingelsene, inkludert annealingstemperatur, forlengelsestid, etc., i henhold til de spesifikke forholdene som maltypen, størrelsen på målfragmentet, basesekvensen til det amplifiserte fragmentet og GC-innholdet og lengden på primeren.

Oppbevaring

-20 ± 5 °C i 2 år eller ved -80 °C for langtidslagring.

  • Tidligere:
  • Neste:

    • Ingen forsterkningssignaler

    1. Taq DNA-polymerase i settet mister sin aktivitet på grunn av feil oppbevaring eller utløp av settet.
    Anbefaling: Bekreft oppbevaringsforholdene for settet;legg til en passende mengde Taq DNA-polymerase på nytt i PCR-systemet eller kjøp et nytt Real Time PCR-sett for relaterte eksperimenter.

    2. Det er mange hemmere av Taq DNA-polymerase i DNA-malen.
    Forslag: Rens malen på nytt eller reduser mengden mal som brukes.

    3. Mg2+-konsentrasjonen er ikke egnet.
    Anbefaling: Mg2+ konsentrasjonen av 2× Real PCR Mix vi tilbyr er 3,5 mM.For noen spesielle primere og maler kan imidlertid Mg2+-konsentrasjonen være høyere.Derfor kan du tilsette MgCl2 direkte for å optimalisere Mg2+-konsentrasjonen.Det anbefales å øke Mg2+ 0,5 mM hver gang for optimalisering.

    4. PCR-amplifikasjonsbetingelsene er ikke egnet, og primersekvensen eller konsentrasjonen er feil.
    Forslag: bekreft riktigheten av primersekvensen og primeren har ikke blitt degradert;Hvis forsterkningssignalet ikke er bra, prøv å senke annealingstemperaturen og juster primerkonsentrasjonen på riktig måte.

    5. Mengden mal er for liten eller for mye.
    Anbefaling: Utfør mallineariseringsgradientfortynning, og velg malkonsentrasjonen med den beste PCR-effekten for sanntids PCR-eksperiment.

    NTC har for høy fluorescensverdi

    1.Reagenskontaminering forårsaket under drift.
    Anbefaling: Bytt ut med nye reagenser for sanntids PCR-eksperimenter.

    2. Forurensning skjedde under fremstillingen av PCR-reaksjonssystemet.
    Anbefaling: Ta nødvendige beskyttelsestiltak under drift, som: bruk av latekshansker, bruk av pipettespiss med filter, etc.

    3. Primerne brytes ned, og nedbrytningen av primerne vil forårsake uspesifikk amplifikasjon.
    Forslag: Bruk SDS-PAGE-elektroforese for å oppdage om primerne er degradert, og erstatt dem med nye primere for sanntids PCR-eksperimenter.

    Primer dimer eller ikke-spesifikk amplifikasjon

    1. Mg2+-konsentrasjonen er ikke egnet.
    Anbefaling: Mg2+ konsentrasjonen til 2× Real PCR EasyTM Mix vi tilbyr er 3,5 mM.For noen spesielle primere og maler kan imidlertid Mg2+-konsentrasjonen være høyere.Derfor kan du tilsette MgCl2 direkte for å optimalisere Mg2+-konsentrasjonen.Det anbefales å øke Mg2+ 0,5 mM hver gang for optimalisering.

    2. PCR-glødetemperaturen er for lav.
    Forslag: Øk PCR-glødingstemperaturen med 1 ℃ eller 2 ℃ hver gang.

    3.PCR-produktet er for langt.
    Anbefaling: Lengden på sanntids PCR-produktet bør være mellom 100-150 bp, ikke mer enn 500 bp.

    4. Primerne brytes ned, og nedbrytningen av primerne vil føre til utseendet til spesifikk amplifikasjon.
    Forslag: Bruk SDS-PAGE-elektroforese for å oppdage om primerne er degradert, og erstatt dem med nye primere for sanntids PCR-eksperimenter.

    5. PCR-systemet er feil, eller systemet er for lite.
    Forslag: PCR-reaksjonssystemet er for lite vil føre til at deteksjonsnøyaktigheten reduseres.Det er best å bruke reaksjonssystemet anbefalt av det kvantitative PCR-instrumentet for å kjøre Real Time PCR-eksperimentet på nytt.

    Dårlig repeterbarhet av kvantitative verdier

    1. Instrumentet fungerer ikke.
    Forslag: Det kan være feil mellom hvert PCR-hull i instrumentet, noe som resulterer i dårlig reproduserbarhet under temperaturstyring eller deteksjon.Vennligst sjekk i henhold til instruksjonene til det tilsvarende instrumentet.

    2. Prøvens renhet er ikke god.
    Anbefaling: Urene prøver vil føre til dårlig reproduserbarhet av eksperimentet, som inkluderer renheten til malen og primere.Det er best å rense malen på nytt, og primerne renses best med SDS-PAGE.

    3. Forberedelses- og lagringstiden for PCR-systemet er for lang.
    Forslag: Bruk Real Time PCR-systemet for PCR-eksperiment umiddelbart etter klargjøring, og ikke la det stå til side for lenge.

    4. PCR-amplifikasjonsbetingelsene er ikke egnet, og primersekvensen eller konsentrasjonen er feil.
    Forslag: bekreft riktigheten av primersekvensen og primeren har ikke blitt degradert;Hvis forsterkningssignalet ikke er bra, prøv å senke annealingstemperaturen og juster primerkonsentrasjonen på riktig måte.

    5. PCR-systemet er feil, eller systemet er for lite.
    Forslag: PCR-reaksjonssystemet er for lite vil føre til at deteksjonsnøyaktigheten reduseres.Det er best å bruke reaksjonssystemet anbefalt av det kvantitative PCR-instrumentet for å kjøre Real Time PCR-eksperimentet på nytt.

    Skriv din melding her og send den til oss

    I slektProdukter

    Trykk på Enter for å søke eller ESC for å lukke