Animal Tissue Direct PCR kit-UNG (uten prøvetakingsverktøy) protokoll
Kitbeskrivelse:
Bruk dyrevevlysat direkte som mal for PCR-amplifisering, uten separat ekstraksjon av DNA, rask og høy sensitivitet.Lagt til UNG anti-forurensningssystem for å eliminere falske positiver.
◮Ingen tidkrevende og kostbar DNA-rensing er nødvendig.
◮Prøvebehovet er lite, bare ta ett enkelt frø.
◮Ingen spesielle behandlinger som sliping og knusing er nødvendig, og operasjonen er enkel.
◮Det optimaliserte PCR-systemet gjør at PCR har høyere spesifisitet og sterkere toleranse for PCR-reaksjonshemmere.
Beskrivelser
Dette settet bruker et unikt lyseringsbuffersystem for raskt å frigjøre genomisk DNA fra dyrevevsprøver for PCR-reaksjoner, så det er spesielt egnet for storskala genetisk testing.
Prosessen med å frigjøre genomisk DNA fra lyseringsbufferen fullføres innen 10-30 minutter ved 65°C.Ingen andre prosesser som protein- og RNA-fjerning er nødvendig, og det frigjorte spor-DNA-et kan brukes som mal for PCR-reaksjon.
2×PCR EnkelTMMix (UNG) bruker dUTP i stedet for dTTP på grunnlag av 2×PCR EasyTMBland og tilsett UNG-enzym (Uracil-N-glykosylase) som kan bryte ned malen som inneholder dUTP samtidig.Før PCR-reaksjonen brukes UNG-enzymet til å bryte ned PCR-produktet som inneholder uracil.UNG-enzymet vil ikke ha noen effekt på malen som ikke inneholder uracil, og sikrer dermed spesifisiteten og nøyaktigheten av amplifikasjon og forhindrer muligheten for kontaminering av PCR-produkter under storskala genetisk testing.
D-Taq DNA-polymerase er en DNA-polymerase spesielt utviklet av Foregene for direkte PCR-reaksjoner.D-Taq DNA-polymerase har sterk toleranse for en rekke PCR-reaksjonshemmere, og kan effektivt amplifisere spormengder av DNA i ulike komplekse reaksjonssystemer, og amplifikasjonshastigheten kan nå 2Kb/min, noe som er spesielt egnet for direkte PCR-reaksjon.
Komponenter i sett
| Del I | Buffer AL |
| Foregene Protease | |
| 6× DNA-innlastingsbuffer | |
| Del II | 2×PCR EnkelTMBland (UNG) |
Egenskaper og fordeler
■Ingen tidkrevende og kostbar DNA-rensing
■ Prøvebehovet er lite, så lite som 5 mg dyrevev kan testes.
■ Ingen spesiell behandling som sliping og knusing er nødvendig, og operasjonen er enkel.
■ Optimalisert PCR-system gjør at PCR har høyere spesifisitet og sterkere toleranse for PCR-reaksjonshemmere.
■ Anti-forurensning PCR-system 2×PCR enkeltTMMix (UNG) eliminerer effektivt forurensningen forårsaket av PCR-produkter og sikrer spesifisiteten og nøyaktigheten til amplifikasjon.
Settparametere
Bruksområde: en rekke dyrevev.
DNA frigjort fra prøvelysis: kun brukt som en PCR-mal.
Settet kan brukes til følgende formål: identifikasjon av transgenose, genotyping av dyr, etc.
Arbeidsflyt
Lagring og holdbarhet
Del I av dette settet bør lagres ved 2-8℃.
Reagensbuffer AL kan lagres i 12 måneder under tørre forhold;den kan lagres ved 2-8℃for lengre lagring.
Reagens Foregene Protease har en unik formel.For å sikre aktiviteten og stabiliteten, vennligst oppbevar den på 4℃i 12 måneder.
Reagens 6×DNA Loading Buffer kan lagres ved 4℃eller -20℃i lang tid.
Del II av dette settet bør oppbevares ved -20℃.
Reagens 2×PCR enkeltTMBland(UNG), hvis den brukes ofte, kan den også lagres ved 4℃for korttidslagring (bruk opp innen 10 dager).
