QuickEasyᵀᴹ Real Time PCR Kit-Taqman
Beskrivelser
2× QuickEasyTMEkte PCR Mix-Taqman levert av QuickEasyTMReal Time PCR Kit-Taqman kit er en ny generasjon master mix system designet for Real Time PCR amplifikasjonsreaksjon ved bruk av spesifikke fluorescerende prober.Dens kjerne Foregene HS Taq DNA-polymerase er basert på antistoffmodifikasjon, brukt i forbindelse med Foregene ytterligere optimalisert PCR-system, har høyere spesifisitet og amplifikasjonseffektivitet.Sammenlignet med vanlig PCR-blanding har den sterkere amplifikasjonsevne og lavere mismatchhastighet.Den kan brukes i fluorescens kvantitativ PCR-reaksjon for å redusere ikke-spesifikk amplifikasjon og forbedre nøyaktigheten av PCR.Det kan i stor grad forbedre produktspesifisiteten og reaksjonsfølsomheten.Samtidig ble ROX levert som et internt referansefargestoff.
QuickEasyTMReal Time PCR Kit-Taqman kit har et bredt anvendelsesområde for mengden mal, og kan oppnå en god standardkurve i forskjellige kvantitative regioner, og kan nøyaktig kvantifisere og oppdage målgener med god repeterbarhet og høy sikkerhet.
Spesifikasjoner
200 forberedelser,500 forberedelser,1000 forberedelser,2000 Forberedelser
Komponenter i sett
RaskEasyTMSanntids PCR Kit-Taqman(20μlsystem) | ||||
Settets innhold | QP-01121 | QP-01122 | QP-01123 | QP-01124 |
200 forberedelser | 500 forberedelser | 1000 forberedelser | 2000 Forberedelser | |
2×RaskLettTM Ekte PCR Blande-Taqman | 1 ml×2 | 1,7 ml×3 | 1,7 ml×6 | 1,7 ml×12 |
20×ROX Reference Dye | 200μL | 0,5 ml | 1 ml | 1 ml×2 |
DNase-fri ddH2O | 1,7 ml | 1,7 ml×2 | 10 ml | 20 ml |
HVIS DU | 1stykke | 1stykke | 1stykke | 1stykke |
Egenskaper og fordeler
■ Det unike PCR-optimaliseringssystemet gjør 2×QuickEasyTMEkte PCR Mix-Taqman mer kompatibel.
■ Hot-start Foregene HS Taq Polymerase har høyere amplifikasjonseffektivitet, høyere amplifikasjonssensitivitet og høyere amplifikasjonsspesifisitet.
■ 2× RaskEasyTM Real PCR Mix -Taqman bruker et unikt system optimalisert av Foregene for å forbedre sensitiviteten og spesifisiteten til sekvensspesifikk probe-deteksjon, som kan brukes til genotyping og bestemmelse av kopinummervariasjoner og oppnå nøyaktige resultater.
■ Dette produktet leveres med ROX intern referansefarge, som kan brukes til å eliminere signalbakgrunn og signalfeil mellom brønner, noe som er praktisk for kunder å bruke i forskjellige typer kvantitative PCR-instrumenter.
Påføring av sett
■ Fluorescens kvantitativ PCR for mal kvantitativ analyse;
■ Ckonvensjonell PCR-amplifikasjon;
■ Kan brukes til alleldeteksjon.
Lagring og holdbarhet
Settet bør oppbevares ved -20°C i mørket;hvis den brukes ofte, kan den også oppbevares ved 4°C i en kort periode (brukes opp innen 10 dager).
Real Time PCR primer designprinsipper
Forward Primer og Reverse Primer
For sanntids PCR er primerdesign veldig viktig.Primere er relatert til spesifisiteten og effektiviteten til PCR-amplifikasjon, og kan utformes med referanse til følgende prinsipper:
Primerlengde: 18-30bp.
GC-innhold: 40-60%.
Tm-verdi: Primer-designprogramvare, som Primer 5, kan gi Tm-verdien til primeren.Tm-verdiene til oppstrøms og nedstrøms primere bør være så nærme som mulig.Tm-beregningsformelen kan også brukes: Tm = 4 °C (G + C) + 2 °C (A + T).Når du utfører PCR, velges vanligvis en temperatur under primerens Tm-verdi på 5 °C som annealingstemperatur (den tilsvarende økningen i annealingstemperaturen kan øke spesifisiteten til PCR-reaksjonen).
Primere og PCR-produkter:
Design primer PCR amplifikasjonsproduktlengde er fortrinnsvis 100-150 bp.
Designprimere i det sekundære strukturelle området av malen bør unngås så mye som mulig.
Unngå dannelsen av 2 eller flere komplementære baser mellom 3′-endene av oppstrøms- og nedstrømsprimere.
Primer 3′ terminalbase kan ikke være til stede med 3 ekstra påfølgende G eller C.
Primerne i seg selv kan ikke ha komplementære strukturer, ellers vil det dannes en hårnålsstruktur som påvirker PCR-amplifisering.
ATCG bør fordeles så jevnt som mulig i primersekvensen, og den 3′ terminale basen bør unngås som T.
Vedlegg 1:Cell Direct RT-qPCR Kit-komponenttilleggspakke
1.Cellelyseløsning
| |||
Komponenter i sett (24-brønners lyseringssystem / brønn) | DRT-01011-A1 | DRT-01011-A2 | |
100 T | 500 T | ||
DelJeg | Buffer CL | 20 ml | 100 ml |
Foregene Protease Plus II | 400 μl | 1 ml × 2 | |
Buffer ST | 1 ml × 2 | 10 ml | |
DelII | DNA viskelær | 400 μl | 1 ml × 2 |
2.RT Bland
| |
Komponenter i sett (20 μl reaksjonssystem) | DRT-01011-B1 |
200 T | |
5× Direct RT Mix | 800 μl |
RNase-fri ddH2O | 1,7 ml × 2 |
| ||
Komponenter i sett (20 μl reaksjonssystem) | DRT-01011-C1 | DRT-01011-C2 |
200 T | 1000 T | |
2× Direct qPCR Mix-SYBR | 1 ml × 2 | 1,7 ml × 6 |
50× ROX Reference Dye | 40 μl | 200 μl |
RNase-fri ddH2O | 1,7 ml | 10 ml |