Introduksjon:

RNA-molekyler kan interagere mye med andre biologiske molekyler, som protein, DNA og RNA, og eksisterer dermed i celler og organismer i form av makromolekylære komplekser.Blant dem er RNA-proteinkomplekser eksistensen og funksjonen til RNA En av de viktige formene for.RNA pull-down er en klassisk metode for screening og identifisering av RNA-molekyler, spesielt de interagerende proteinene til lncRNA-molekyler, og er anerkjent av flertallet av forskere og internasjonale autoritative akademiske tidsskrifter.I dag vil FORREGENE dele med deg det eksperimentelle prinsippet og den tekniske prosessen med RNA-nedtrekk, kanskje du kan bruke det

1. Det eksperimentelle prinsippet for RNA pull down-teknologi:

In vitro transkripsjon og syntese av biotin-merket mål-lncRNA- eller lncRNA-fragmenter (inkludert RNA-fragmenter brukt som positive og negative kontroller), og inkuber med celleekstrakter;bruk avidin-forankret magnetiske perler for å samle RNA-protein eller RNA-RNA komplekser. Etter grundig vasking elueres komplekset.Hvis du oppdager proteinmålmolekylet som interagerer med lncRNA, utfør proteinelektroforese på RNA-pull-down-produktet, detekter målproteinet ved sølvfarging og kutt gelen for massespektrometri;også utføre western blot-verifisering direkte på nedtrekksproduktet;hvis det oppdages For RNA-målmolekyler som interagerer med lncRNA, blir RNA-pull-down-produkter utsatt for RNA-ekstraksjon og spesifikk qRT-PCR-deteksjon utføres.

2. RNA-trekk ned teknologieksperimentprosess:

3. Teknisk tjeneste for RNA-nedtrekking av FOREGENE:

Cellekultur

Fremstilling av celletotal/nukleært/plasmaproteinekstrakt

RNA pull down eksperiment

SDS-PAGE elektroforese, sølvbeis

Massespektrometri og WB-eksperimenter

Eksperimentell rapport

4. Eksperimentell case

Følgende figur viser resultatene av FJ Bio-Bios RNA pull down og SDS-PAGE elektroforesedeteksjon, der den røde pilen markerer forskjellsbåndet:

Forskningsgruppen til professor Song Xu fra Sichuan University har samlet 15 år med langsiktig akkumulering innen lncRNA-forskning.Foregene Bio og professor Song Xus forskningsgruppe samarbeidet for å lansere RNA pull down-teknologien til lncRNA, som vil gi deg et tilfredsstillende resultat for eksperimentet ditt.