Hot-start Taq enzym er mye brukt.Sammenlignet med vanlig DNA-polymerase, kan hot-start Taq-enzym effektivt unngå uspesifikk amplifikasjon og dannelse av primer-dimerer, og kan effektivt forbedre suksessraten for målgenamplifikasjon.Spesielt innen genetisk testing er hot-start Taq enzym identifisert som en obligatorisk standard i industrien, og vanlig DNA-polymerase bør ikke brukes.Som man kan se av ovenstående, er hot-start Taq-enzymer mye brukt.For tiden er det mange merker av hot-start Taq-enzymer på hjemmemarkedet, men det er ikke mange hot-start Taq-enzymer med høy kvalitet.Stilt overfor så mange hot-start Taq enzymprodukter, hvordan bør vi velge?

1. Velg hotstart Taq-enzymet med høy amplifikasjonseffektivitet

PCR-amplifikasjonseffektivitet er nært knyttet til ytelsen til Taq-enzymet.Etter at et godt Taq-enzymreaksjonssystem er optimalisert, er amplifikasjonseffektiviteten over 95 %, og amplifikasjonsområdet til den opprinnelige malmengden er bredt.Tilfredsstillende amplifikasjon kan oppnås når målgeninnholdet er lavt, og det er ikke lett å bli forgiftet når malmengden er høy, og den eksponentielle amplifikasjonsperioden er lang.For Taq-enzymet med dårlig ytelse, selv om reaksjonssystemet har blitt optimalisert for mange ganger, er amplifikasjonseffektiviteten fortsatt mindre enn 90 %, "S"-formen til amplifikasjonskurven er ikke åpenbar, hellingen er liten og kurven er flat.Når malmengden er lav, kan den ikke forsterkes, og når malmengden er høy, er forsterkningseffekten ikke ideell.Derfor er utvalget av DNA-polymeraser med høy amplifikasjonseffektivitet avgjørende for suksessen til PCR og qPCR.

2. Velg hotstart Taq-enzym med sterk enzymkraft

Den enzymatiske kraften til Taq-enzymet er relatert til amplifikasjonseffektiviteten.Generelt, jo sterkere den enzymatiske kraften til hot-start Taq-enzymet er, jo lengre er den eksponentielle vekstperioden for PCR-amplifikasjon, jo mer typisk 'S-formet' kurve, jo høyere er fluorescenssignalverdien, og jo mer egnet for multipleks PCR-deteksjon.Merke-DNA-polymeraser med svak enzymatisk kraft kan generelt bare støtte 2-plex-reaksjoner.Når du gjør 3-plex-reaksjoner, er amplifikasjonskurven lav, fluorescenssignalverdien er lav, og det er ingen typisk amplifikasjonskurve, så resultatene er vanskelige å bedømme.

3. Velg et hot-start Taq-enzym med høy følsomhet

Generelt sett har DNA-polymerase høy amplifikasjonseffektivitet og høy følsomhet, men det er også inkonsekvenser.Hvis målgenforekomsten i prøven som skal amplifiseres er lav, anbefales det å teste amplifikasjonssensitiviteten til Taq-enzymet.Den vanligste deteksjonsmetoden er å utføre 10- eller 5-gangers gradientfortynning av målgenets plasmidfragment, utføre PCR-deteksjon ved lavere fortynning og velge hot-start Taq-enzymet med høyere deteksjonsfølsomhet.

Det fremgår av ovenstående at forskere må velge i henhold til egne eksperimentelle krav og finansieringsbetingelser.Det er best å gjøre et amplifikasjonseksperiment med gradientfortynning for å oppdage amplifikasjonseffektiviteten og følsomheten til hot-start Taq-enzymet.

Et eksempel på Foregene's Taq DNA-polymerase:

Foreasy HS Taq DNA-polymerase

Beskrivelse

Foreasy HS Taq DNA-polymerase er en DNA-polymerase uttrykt i Escherichia coli-teknologiske bakterier ved genrekombinasjonsteknologi.Enzymet er kombinert med en unik reaksjonsbuffer, som gjør produktet svært motstandsdyktig og kompatibelt, og kan direkte bruke prøvelysatet (Foregene Lysis system) som mal for deteksjonsreaksjoner.

applikasjon

Kvalitativ PCR og kvantitativ PCR-deteksjon av rensede maler og ikke-rensede maler.

Kvalitetskontroll

1. Ingen eksogen nukleaseaktivitet påvist

2.PCR-metode for å oppdage gjenværende genomisk DNA uten vert

3. Det kan effektivt forsterke enkeltkopigener i det menneskelige genomet

4. Lagre ved romtemperatur i en uke, ingen åpenbare aktivitetsendringer

Produktdetaljer: https://www.foreivd.com/foreasy-hs-taq-dna-polymerase-product/