1: Bytt ut de eksperimentelle forsyningene i tide

Sett opp (NTC) negativ kontroll og gjenta det mange ganger.Når det er funnet at det er PCR-produktforurensning i laboratoriet, bytt ut alle eksperimentelle forsyninger i tide.Slik som: fortynne og klargjøre primerne på nytt, sterilisere pipettespissen, EP-røret, ddH2O osv., erstatte med en ny pipette, og midlertidig låne andre laboratorier for å utføre PCR-eksperimenter.Det kontaminerte laboratoriet skal ventileres og bestråles med ultrafiolette stråler inntil PCR-produktkontamineringen er eliminert før forsøket fortsettes.

2: Forleng UV-eksponeringstiden

Det er verdt å merke seg at for å fjerne DNA-forurensning, bør vanlig ultrafiolett stråling forlenges med 2 timer enn vanlig.Likevel er effekten av UV-bestråling på fjerning av små fragmenter (under 200 bp) av DNA-kontaminering fortsatt ikke god.

Ultrafiolett bølgelengde (nm) er vanligvis 254/300 nm, og det er nok til å bestråle i 30 minutter.Det skal bemerkes at når man velger UV for å eliminere kontaminering av gjenværende PCR-produkter, bør lengden på PCR-produktet og fordelingen av baser i produktsekvensen vurderes.UV-bestråling er kun effektiv for lange fragmenter over 500 bp, og har liten effekt på korte fragmenter.

Under UV-bestråling vil pyrimidinbasene i PCR-produktet danne dimerer.Disse dimerene kan terminere forlengelsen, men ikke alle pyrimidiner i DNA-kjeden kan danne dimerer, og UV-bestråling kan også bryte dimerene..Graden av dimerdannelse avhenger av UV-bølgelengden, typen pyrimidindimer og sekvensen av nukleotider ved siden av dimerstedet.Derfor, hvis de PCR-amplifiserte fragmentene er små, anbefales det å bruke UNG anti-PCR-produktkontamineringssystem.

3: Vanlig brukte DNA-forurensningsrensere

Aerosoler genereres lett når pipetter tilsettes, noe som er vanskelig å unngå, og det vil sette seg raskt.Derfor er det utvilsomt et godt valg å ofte bruke spesielle DNA-forurensningsrensere for å hindre spredning av DNA-forurensning.

4: Bruk UNG anti-forurensningssystem

Etter at PCR-produktkontamineringen er fjernet, kan testlaboratoriet bruke UNG anti-PCR-produktkontamineringssystem for å forhindre PCR-produktkontaminering.I generelle laboratorier kan du utføre enkle eksperimentelle partisjoner, strengt skille PCR-produktområdet fra andre områder, etablere visse laboratorieregler og forskrifter og gjennomføre relevant opplæring for å forhindre forekomst av PCR-produktkontaminering.

Anbefalinger: Etablering av et rimelig PCR-laboratorium, opprettholde et godt PCR-miljø, formulere standard PCR-driftsprosedyrer og dyrke den strenge driftsbevisstheten til eksperimentatorer er nøkkelen til å forhindre eller redusere forurensning av PCR-eksperimenter.