Fødselen av PCR
PCR (Polymerase Chain Reaction)
Det har gått mer enn 30 år siden oppfinnelsen av polymerasekjedereaksjon.I mer enn 30 år, etter at mange forskere rundt om i verden fortsetter å supplere og forbedre, har PCR-teknologi blitt den mest brukte og mest brukte og viktigste grunnleggende forskningsmetoden i hele biovitenskapsfeltet.
TouchDown PCR, Real-Time PCR, Multi PCR, etc. utviklet på grunnlag av den brede anvendelsen av tradisjonell PCR-teknologi, så vel som den nyoppståtte Digital PCR (digital PCR), har i stor grad beriket forskningsmetodene til flertallet av vitenskapelige forskere og kraftig akselerert utviklingsprosessen av moderne biovitenskap, spesielt molekylærbiologi, har gitt et stort bidrag til menneskehetens liv og natur.
Defekter ved tradisjonell PCR-teknologi
Kompleks nukleinsyreseparasjon ogutdrag:
★ Tradisjonell PCR-teknologi: nødvendig
★ PCR-avledet teknologi: nødvendig
★ DNA- og RNA-prøver: store forskjeller, vanskelige driftskrav
★ Kroppsfarer: giftige reagenser skader kroppen
Tradisjonell PCR-teknologi og derivatteknologi har en forutsetning - nukleinsyreseparasjon og -rensing
Enhver biologisk prøve må gå gjennom en rekke kompliserte og kjedelige prøvebehandlinger for å få nukleinsyreprøver som oppfyller kravene til PCR-teknologi.
Separasjon og utvinning av DNA og RNA har alltid vært en grunnleggende oppgave som relevante vitenskapelige forskere må gjenta hver dag.
På grunn av de store forskjellene mellom prøvene, er separasjons- og ekstraksjonsprosessene av DNA og RNA også svært forskjellige.Dette arbeidet krever høy teknisk kompetanse for operatørene.Tradisjonelle separasjons- og ekstraksjonsteknikker krever langvarig kontakt med noen svært giftige kjemiske reagenser.Det vil forårsake irreversibel skade på operatørens kropp, og til og med forårsake direkte skade under eksperimentet.
Samtidig er separasjon og ekstraksjon av nukleinsyrer en arbeidskrevende oppgave for de som har et stort antall prøver å studere.
Nukleinsyreisolerings- og ekstraksjonssett på markedet er nå modne og det er mange merker, men de er omtrent like.Enten det er et sentrifugalsett med silikagelmembrankolonne eller et magnetisk perlemetodesett, tar det mye tid og er kostbart.I tillegg til kostnaden for settet er det også spesielle krav til laboratorieutstyr.Den automatiserte arbeidsstasjonen som brukes i den magnetiske perlemetoden er et veldig typisk storskala høyverdiutstyr, som er en stor kostnad for laboratoriet.
oppsummert
Før man utfører PCR-eksperimenter, er forbehandling av prøver en uunngåelig og alltid hodepine for forskere.Hvordan løse dette problemet og om PCR-eksperimenter kan utføres uten separasjon og ekstraksjon av nukleinsyrer har alltid vært tankene til flertallet av vitenskapelige forskere og klinisk laboratoriepersonell.
Foregenes løsning
Etter år med møysommelig forskning på Direct PCR-teknologi og relaterte sett, brøt Forgene med suksess gjennom mange flaskehalser og oppnådde med suksess direkte PCR for mange typer forskjellige prøver med sterk motstand og tilpasningsevne, noe som tillater forskere å bli kvitt tungvint og farlig separasjon og ekstraksjon av nukleinsyrer.Dette vil i stor grad redusere alles arbeidsintensitet, fremskynde eksperimentprosessen og spare vitenskapelige forsknings- og testkostnader.
Forgenes forståelse og kunnskap om DirectPCR
For det første er DirectPCR-teknologi en direkte PCR-teknologi for ulike biologiske prøvevev.Under denne tekniske tilstanden er det ikke nødvendig å separere og ekstrahere nukleinsyrer, og vevsprøven brukes direkte som objekt, og målgenprimerne tilsettes for PCR-reaksjon.
For det andre er DirectPCR-teknologi ikke bare en tradisjonell DNA-template-amplifikasjonsteknologi, men inkluderer også RNA-template revers transkripsjon PCR.
For det tredje utfører DirectPCR-teknologi ikke bare rutinemessige kvalitative PCR-reaksjoner på vevsprøver, men inkluderer også qPCR-reaksjoner i sanntid, som krever at reaksjonssystemet har en sterk evne til å motstå bakgrunnsfluorescensinterferens og å motvirke endogene fluorescensslukkere.
For det fjerde krever vevsprøvene som er målrettet av DirectPCR-teknologien bare frigjøring av nukleinsyremaler og fjerner ikke proteiner, polysakkarider, saltioner osv. som forstyrrer PCR-reaksjonen.Dette krever at nukleinsyrepolymerasen og PCR-blandingen i reaksjonssystemet har utmerket anti-reversibilitet og tilpasningsevne, og kan sikre enzymaktivitet og replikasjonsnøyaktighet under komplekse forhold.
For det femte har ikke vevsprøvene målrettet av DirectPCR-teknologien blitt utsatt for noen nukleinsyreanrikningsbehandling, og malmengden er svært liten, noe som krever ekstremt høy følsomhet og amplifikasjonseffektivitet av reaksjonssystemet.
Konklusjon
DirectPCR-teknologi er en av de viktigste teknologiske utviklingene og innovasjonene de siste 30 årene siden PCR-teknologiens fødsel.Forgene har og vil fortsette å være en pioner og innovatør av denne teknologien.
Applikasjonsutsiktene for DirectPCR-teknologi er svært brede.Den kontinuerlige forbedringen og promoteringen av denne teknologien vil helt sikkert bringe subversive endringer i vitenskapelig forskning og inspeksjonsarbeid.Dette er en PCR-teknologirevolusjon.
Innleggstid: 21. februar 2017
