Viralt DNA&RNA isolasjonssett Viralt DNA og RNA ekstraksjonsrensesett
Spesifikasjoner
50 forberedelser, 200 forberedelser
Viral RNA Nucleic acid Purification Extraction Isolation Kit bruker spinnkolonnen og formelen utviklet av Foregene, som effektivt kan trekke ut viralt RNA med høy renhet og høy kvalitet fra prøver som plasma, serum, cellefri kroppsvæske og cellekultursupernatant.Settet legger spesifikt til Lineær Akrylamid, som enkelt kan fange opp små mengder RNA fra prøvene.RNA-bare kolonne kan effektivt binde RNA.Settet kan behandle et stort antall prøver samtidig.
Hele settet inneholder ikke RNase, så det rensede RNA vil ikke bli degradert.Buffer viRW1 og Buffer viRW2 kan sikre at den oppnådde virale nukleinsyren er fri for protein, nuklease eller andre urenheter, som kan brukes direkte til nedstrøms molekylærbiologiske eksperimenter.
Komponenter i sett
| Lineær akrylamid |
| Buffer DRL |
| Buffer RW1, Buffer RW2 |
| RNase-fri ddH2O |
| DNA/RNA-kolonne |
| Bruksanvisning |
Egenskaper og fordeler
■ Drift ved romtemperatur (15-25 ℃) gjennom hele prosessen, uten isbad og lavtemperatursentrifugering.
■ Komplett sett RNase-fri, ingen grunn til å bekymre deg for RNA-nedbrytning.
■ Høyt nukleinsyreutbytte: Kun DNA/RNA Kolonne og unik formel kan effektivt rense DNA og RNA.
■ Stor prøvebehandlingskapasitet: opptil 200 μl prøver kan behandles hver gang.
■ Rask hastighet: enkel å betjene og kan gjennomføres innen 20 minutter.
■ Sikkerhet: ingen organisk reagens er nødvendig.
■ Høy kvalitet: De rensede RNA-fragmentene er av høy renhet, fri for protein og andre urenheter, og kan møte ulike nedstrøms eksperimentelle applikasjoner.
Påføring av sett
Den er egnet for ekstraksjon og rensing av viral nukleinsyre i prøver som plasma, serum, cellefri kroppsvæske og cellekultursupernatant.
Arbeidsflyt
Diagram
Lagring og holdbarhet
■ Dette settet kan lagres i 24 måneder under tørre forhold ved romtemperatur (15-25 ℃);hvis den må lagres over lengre tid, kan den lagres i 2–8 ℃.
■ Lineær akrylamidløsning kan oppbevares ved romtemperatur i 7 dager;etter å ha mottatt settet, ta det ut og oppbevar det ved -20°C.
■ Etter tilsetning av lineær akrylamide til buffer DRL, kan den lagres ved 2-8°C i opptil 48 timer.Vennligst bruk den ferdige løsningen.
Veiledning for problemanalyse
Følgende er en analyse av problemene som kan oppstå ved utvinning av viralt DNA/RNA, i håp om å være nyttig for eksperimentene dine.I tillegg, for andre eksperimentelle eller tekniske problemer enn bruksinstruksjoner og problemanalyse, har vi dedikert teknisk støtte for å hjelpe deg.Hvis du har behov, vennligst kontakt oss: 028-83360257 eller E-post:
Tech@foregene.com.
Ingen nukleinsyreekstraksjon eller lavt nukleinsyreutbytte
Det er vanligvis mange faktorer som påvirker utvinningseffektiviteten, for eksempel: prøvenukleinsyreinnhold, operasjonsmetode, elueringsvolum, etc.
Analyse av vanlige årsaker:
1. Et isbad eller lavtemperatur (4°C) sentrifugering ble utført under prosedyren.
Forslag: Kjør ved romtemperatur (15-25°C) gjennom hele prosessen, ikke isbad og lavtemperatursentrifugering.
2. Prøven ble lagret feil eller prøven ble lagret for lenge.
Anbefaling: Oppbevar prøver ved -80°C og unngå gjentatt frysing og tining;prøv å bruke ferske innsamlede prøver for nukleinsyreekstraksjon.
3. Utilstrekkelig prøvelysering.
Anbefaling: Sørg for at prøven og lyseringsløsningen er grundig blandet og inkubert ved romtemperatur (15-25°C) i 10 minutter.
4. Feil tilsetning av elueringsmiddel.
Forslag: Pass på at RNase-Free ddH2O tilsettes dråpevis til midten av rensekolonnemembranen, og ikke slipp det på rensekolonneringen.
5. Riktig volum absolutt etanol ble ikke tilsatt buffer RW2.
Forslag: Følg instruksjonene, tilsett riktig volum absolutt etanol til buffer RW2 og bland godt før du bruker settet.
6. Upassende prøvevolum.
Forslag: 200 µl prøve behandles for hver 500 µl buffer DRL.Overdreven prøvebehandling vil resultere i lavere nukleinsyreekstraksjonsutbytte.
7. Upassende elueringsvolum eller ufullstendig eluering.
Anbefaling: Elueringsvolumet i rensekolonnen er 30-50μl;hvis elueringseffekten ikke er tilfredsstillende, anbefales det å forlenge tiden ved romtemperatur etter tilsetning av forvarmet RNase-Free ddH2O, slik som 5-10min.
8. Etanol forblir på kolonnen etter vask med buffer RW2.
Forslag: Hvis etanol gjenstår etter sentrifugering med buffer RW2 i 2 minutter, kan kolonnen plasseres ved romtemperatur i 5 minutter etter sentrifugering for å fjerne gjenværende etanol fullstendig.
Den rensede nukleinsyren brytes ned
Kvaliteten på den rensede nukleinsyren er relatert til bevaring av prøven, RNase-kontaminering, drift og andre faktorer.Analyse av vanlige årsaker:
1. De innsamlede prøvene ble ikke lagret i tide.
Forslag: Hvis prøven ikke brukes i tide etter innsamling, vennligst oppbevar den ved -80°C ved lav temperatur umiddelbart.For RNA-ekstraksjon, prøv å bruke ferske innsamlede prøver.
2. Samle prøver og frys og tin gjentatte ganger.
Forslag: Unngå frysing og tining (ikke mer enn én gang) under innsamling og lagring av prøver, ellers vil nukleinsyreutbyttet reduseres.
3. RNase introduseres i operasjonsrommet eller engangshansker, masker osv. brukes ikke.
Anbefaling: RNA-ekstraksjonsforsøk utføres best i et eget RNA-operasjonsrom, og laboratoriebordet bør rengjøres før forsøket.
Bruk engangshansker og -masker under forsøket for å unngå RNA-nedbrytning forårsaket av introduksjon av RNase i størst grad.
4. Reagenset ble kontaminert med RNase under bruk.
Anbefaling: Bytt ut med et nytt viralt DNA/RNA-isolasjonssett for relaterte eksperimenter.
5. Sentrifugerørene og pipettespissene som brukes til RNA-manipulering er kontaminert med RNase.
Forslag: Sørg for at sentrifugerørene, pipettespissene, pipettene osv. som brukes til RNA-ekstraksjon, alle er RNase-frie.
Renset nukleinsyre påvirker nedstrøms eksperimenter
DNA og RNA renset av rensekolonnen, hvis saltion- og proteininnholdet er for høyt, vil det påvirke nedstrøms-eksperimentene, som: PCR-amplifikasjon, revers transkripsjon, etc.
1. Det eluerte DNA og RNA har restsaltioner.
Forslag: Sørg for at riktig volum absolutt etanol tilsettes buffer RW2, og vask rensekolonnen to ganger med sentrifugeringshastigheten spesifisert i bruksanvisningen;Utfør sentrifugering for å minimere saltionforurensning.
2. Det eluerte DNA og RNA har etanolrester.
Forslag: Etter å ha bekreftet vaskingen med Buffer RW2, utfør sentrifugering av tomme rør ved sentrifugeringshastigheten i bruksanvisningen;hvis det fortsatt er etanolrester, kan du sentrifugere det tomme røret og deretter plassere det i romtemperatur i 5 minutter for å fjerne etanolrestene i størst grad.
Bruksanvisninger:
Bruksanvisning for viralt DNA og RNA isolasjonssett
