• facebook
  • linkedin
  • youtube
side_banner

Sanntids PCR Easyᵀᴹ-Taqman

Kitbeskrivelse:

Enkel—2× PCR-miks for å redusere eksperimentelle feil og driftstid

Spesifikt – optimalisert buffer og hot-start Taq-enzym kan forhindre uspesifikk amplifikasjon og dannelse av primerdimer

Høy følsomhet – kan oppdage lave kopier av malen

God allsidighet – kompatibel med de fleste kvantitative PCR-instrumenter i sanntid

foregen styrke


Produkt detalj

Produktetiketter

FAQ

Kitbeskrivelser

2X Real PCR EasyTMMix-Taqman levert av Real Time PCR EasyTM-Taqman-settet er et nytt premix-system som bruker spesifikke fluorescerende prober for sanntids PCR-amplifikasjonsreaksjoner, noe som i stor grad kan forbedre produktspesifisiteten og reaksjonssensitiviteten.ROX leveres som internkontrollfargestoff.

2X Ekte PCR EnkelTMMix-Taqman inneholder Foregenes unike hot-start Taq DNA Polymerase.Sammenlignet med vanlige Taq-enzymer har den fordelene med høy amplifikasjonseffektivitet, sterk spesifikk amplifikasjonsevne og lav mismatchhastighet.Det kan redusere uspesifikk forsterkning og forbedre nøyaktigheten av PCR.

Spesifikasjoner

Sanntids PCR EnkelTM-Taqman

Settsammensetning (20 μl system)

QP-01021

QP-01022

QP-01023

QP-01024

200T

500T

1000T

2000T

Ekte PCRLettTMBlande-Taqman

1 ml ×2

1.7 ml ×3

1.7 ml ×6

1.7 ml ×12

20×ROX Reference Dye

200 μl

0,5ml

1 ml

1 ml × 2

DNase-fri ddH2O

1,7 ml

1.7 ml ×2

10 ml

20 ml

Iinstruksjon

1

1

1

1

Egenskaper og fordeler

■ Enkel – 2X PCR-blanding for å redusere eksperimentelle feil og driftstid

■ Spesifikt – optimalisert buffer og hot-start Taq-enzym kan forhindre uspesifikk amplifikasjon og dannelse av primerdimer

■ Høy følsomhet – kan oppdage lave kopier av malen

■ God allsidighet – kompatibel med de fleste kvantitative PCR-instrumenter i sanntid

Påføring av sett

qPCR-analyse

Arbeidsflyt

RT PCR-Taqman
RT PCR-Taqman grafikk

Grafisk

Lagring og holdbarhet

Dette settet bør oppbevares vekk fra lys og bør oppbevares ved -20 ℃.Hvis den brukes ofte, kan den også lagres ved 4 ℃ i en kort periode (10 dager).


  • Tidligere:
  • Neste:

  • Ingen forsterkningssignaler

    1. Taq DNA-polymerase i settet mister sin aktivitet på grunn av feil oppbevaring eller utløp av settet.
    Anbefaling: Bekreft oppbevaringsforholdene for settet;legg til en passende mengde Taq DNA-polymerase på nytt i PCR-systemet eller kjøp et nytt Real Time PCR-sett for relaterte eksperimenter.

    2. Det er mange hemmere av Taq DNA-polymerase i DNA-malen.
    Forslag: Rens malen på nytt eller reduser mengden mal som brukes.

    3. Mg2+-konsentrasjonen er ikke egnet.
    Anbefaling: Mg2+ konsentrasjonen av 2× Real PCR Mix vi tilbyr er 3,5 mM.For noen spesielle primere og maler kan imidlertid Mg2+-konsentrasjonen være høyere.Derfor kan du tilsette MgCl2 direkte for å optimalisere Mg2+-konsentrasjonen.Det anbefales å øke Mg2+ 0,5 mM hver gang for optimalisering.

    4. PCR-amplifikasjonsbetingelsene er ikke egnet, og primersekvensen eller konsentrasjonen er feil.
    Forslag: bekreft riktigheten av primersekvensen og primeren har ikke blitt degradert;Hvis forsterkningssignalet ikke er bra, prøv å senke annealingstemperaturen og juster primerkonsentrasjonen på riktig måte.

    5. Mengden mal er for liten eller for mye.
    Anbefaling: Utfør mallineariseringsgradientfortynning, og velg malkonsentrasjonen med den beste PCR-effekten for sanntids PCR-eksperiment.

    NTC har for høy fluorescensverdi

    1.Reagenskontaminering forårsaket under drift.
    Anbefaling: Bytt ut med nye reagenser for sanntids PCR-eksperimenter.

    2. Forurensning skjedde under fremstillingen av PCR-reaksjonssystemet.
    Anbefaling: Ta nødvendige beskyttelsestiltak under drift, som: bruk av latekshansker, bruk av pipettespiss med filter, etc.

    3. Primerne brytes ned, og nedbrytningen av primerne vil forårsake uspesifikk amplifikasjon.
    Forslag: Bruk SDS-PAGE-elektroforese for å oppdage om primerne er degradert, og erstatt dem med nye primere for sanntids PCR-eksperimenter.

    Primer dimer eller ikke-spesifikk amplifikasjon

    1. Mg2+-konsentrasjonen er ikke egnet.
    Anbefaling: Mg2+ konsentrasjonen til 2× Real PCR EasyTM Mix vi tilbyr er 3,5 mM.For noen spesielle primere og maler kan imidlertid Mg2+-konsentrasjonen være høyere.Derfor kan du tilsette MgCl2 direkte for å optimalisere Mg2+-konsentrasjonen.Det anbefales å øke Mg2+ 0,5 mM hver gang for optimalisering.

    2. PCR-glødetemperaturen er for lav.
    Forslag: Øk PCR-glødingstemperaturen med 1 ℃ eller 2 ℃ hver gang.

    3.PCR-produktet er for langt.
    Anbefaling: Lengden på sanntids PCR-produktet bør være mellom 100-150 bp, ikke mer enn 500 bp.

    4. Primerne brytes ned, og nedbrytningen av primerne vil føre til utseendet til spesifikk amplifikasjon.
    Forslag: Bruk SDS-PAGE-elektroforese for å oppdage om primerne er degradert, og erstatt dem med nye primere for sanntids PCR-eksperimenter.

    5. PCR-systemet er feil, eller systemet er for lite.
    Forslag: PCR-reaksjonssystemet er for lite vil føre til at deteksjonsnøyaktigheten reduseres.Det er best å bruke reaksjonssystemet anbefalt av det kvantitative PCR-instrumentet for å kjøre Real Time PCR-eksperimentet på nytt.

    Dårlig repeterbarhet av kvantitative verdier

    1. Instrumentet fungerer ikke.
    Forslag: Det kan være feil mellom hvert PCR-hull i instrumentet, noe som resulterer i dårlig reproduserbarhet under temperaturstyring eller deteksjon.Vennligst sjekk i henhold til instruksjonene til det tilsvarende instrumentet.

    2. Prøvens renhet er ikke god.
    Anbefaling: Urene prøver vil føre til dårlig reproduserbarhet av eksperimentet, som inkluderer renheten til malen og primere.Det er best å rense malen på nytt, og primerne renses best med SDS-PAGE.

    3. Forberedelses- og lagringstiden for PCR-systemet er for lang.
    Forslag: Bruk Real Time PCR-systemet for PCR-eksperiment umiddelbart etter klargjøring, og ikke la det stå til side for lenge.

    4. PCR-amplifikasjonsbetingelsene er ikke egnet, og primersekvensen eller konsentrasjonen er feil.
    Forslag: bekreft riktigheten av primersekvensen og primeren har ikke blitt degradert;Hvis forsterkningssignalet ikke er bra, prøv å senke annealingstemperaturen og juster primerkonsentrasjonen på riktig måte.

    5. PCR-systemet er feil, eller systemet er for lite.
    Forslag: PCR-reaksjonssystemet er for lite vil føre til at deteksjonsnøyaktigheten reduseres.Det er best å bruke reaksjonssystemet anbefalt av det kvantitative PCR-instrumentet for å kjøre Real Time PCR-eksperimentet på nytt.

    Skriv din melding her og send den til oss