Plante-DNA-isolasjonssett Genomisk plante-DNA-rensesett Reagensprotokoll
Spesifikasjoner
50 forberedelser, 100 forberedelser, 250 forberedelser
Dette settet bruker en kolonne med kun DNA som spesifikt kan binde DNA, Foregene-protease og et unikt buffersystem, som i stor grad forenkler rensingen av plantegenomisk DNA.Genomisk DNA av høy kvalitet kan oppnås innen 30 minutter, noe som unngår nedbrytning av genomisk DNA.
Den DNA-bare silikagelmembranen som brukes i spinnkolonnen er Foregenes unike nye materiale, som effektivt og spesifikt kan binde seg til DNA, og maksimere fjerningen av RNA, urenhetsproteiner, ioner, polysakkarider, polyfenoler og andre organiske forbindelser.
Produktkomponenter
| Buffer PL1, Buffer PL2 |
| Buffer PW, Buffer WB, Buffer EB |
| Foregene Protease |
| Bare DNA-kolonne |
| Bruksanvisning |
Egenskaper og fordeler
■ Ingen RNase-kontaminering: Den eneste DNA-kolonnen som leveres av settet gjør det mulig å fjerne RNA fra genomisk DNA uten ekstra RNase under eksperimentet, og forhindrer at laboratoriet blir kontaminert av eksogen RNase.
■ Rask hastighet: Foregene Protease har høyere aktivitet enn lignende proteaser og fordøyer vevsprøver raskere.
■ Enkelt: Den genomiske DNA-ekstraksjonsoperasjonen kan fullføres på 30 minutter.
■ Praktisk: Sentrifugeringen utføres ved romtemperatur, ingen 4℃ lavtemperatursentrifugering eller etanolutfelling av DNA er nødvendig.
■ Sikkerhet: ingen organisk reagens er nødvendig.
■ Høy kvalitet: Det rensede genomiske DNA har store fragmenter, ingen RNA, ingen RNase og ekstremt lavt ioneinnhold, kan oppfylle kravene til ulike eksperimenter.
Påføring av sett
Egnet for ekstraksjon og rensing av genomisk DNA fra ferskt eller frossent plantevev.
Arbeidsflyt
Diagram
Lagring og holdbarhet
Settet kan lagres i 12 måneder ved romtemperatur (15–25 ℃) og 2–8 ℃ i lengre tid.
Foregene Protease Plus-løsningen har en unik formel, som er aktiv når den lagres i romtemperatur i lang tid (3 måneder);dens aktivitet og stabilitet vil være bedre når den lagres kl4 ℃, så det anbefales å lagre den ved 4 ℃, husk å ikke lagre ved -20 ℃.
Veiledning for problemanalyse
The following is an analysis of the problems that may be encountered in the extraction of plant genomic DNA, hoping to be helpful to your experiments. In addition, for other experimental or technical problems other than operation instructions and problem analysis, we have dedicated technical support to help you. If you have any needs, please contact us: 028-83360257 or E-mali: Tech@foregene.com.
Lavt utbytte eller ingen DNA
Det er vanligvis mange faktorer som påvirker utbyttet av genomisk DNA, inkludert kilden til prøven, alderen på prøven, lagringsforholdene til prøven og operasjonen.
Genomisk DNA kunne ikke oppnås under ekstraksjon
1. Vevsprøvene er feil lagret eller lagret for lenge, noe som resulterer i nedbrytning av det genomiske DNA.
Anbefaling: Oppbevar vevsprøver i flytende nitrogen eller -20°C;prøve å bruke nyinnsamlede prøver for genomisk DNA-ekstraksjon.
2. For liten prøvemengde kan føre til at tilsvarende genomisk DNA ikke blir ekstrahert.
Forslag: For vevsprøver som har vært lagret i lang tid eller som har alvorlig genomisk DNA-nedbrytning, kan mengden vevsprøver økes hensiktsmessig for å trekke ut betydelig genomisk DNA.Mengden av prøven kan bestemmes i henhold til DNA-behovet, men den ferske prøven bør ikke overstige 100 mg, og den tørre prøven bør ikke overstige 30 mg.
3. Prøven males ikke med flytende nitrogen eller plasseres for lenge etter flytende nitrogen.
Forslag: Under DNA-ekstraksjon må prøven males fullstendig med flytende nitrogen for å bryte celleveggen;etter sliping, overfør prøvepulveret til PL1 forvarmet til 65°C så snart som mulig (når det malte pulveret er smeltet, vil det genomiske DNAet begynne å brytes ned raskt).
4. Feil oppbevaring av Foregene Protease resulterer i redusert eller inaktivert aktivitet.
Anbefaling: Bekreft lagringsbetingelsene for Foregene Protease eller erstatt den med en ny Foregene Protease for enzymatisk hydrolyse.
5. Settet er feil oppbevart eller lagret for lenge, noe som fører til at enkelte komponenter i settet svikter.
Anbefaling: Kjøp et nytt plantegenomisk DNA-ekstraksjonssett for relaterte operasjoner.
6. Feil bruk av settet.
Forslag: Kjøp et plante-DNA-isolasjonssett dedikert til prøver for ekstraksjon og rensing av plantegenomisk DNA.
7. Buffer WB uten å legge til envannfri etanol.
Anbefaling: Sørg for å tilsette riktig volum absolutt etanol til buffer WB.
8. Eluenten ble ikke dryppet på silikamembranen på riktig måte.
Forslag: Tilsett den forvarmede eluenten ved 65°C℃dråpevis til midten av silikagelmembranen, og la den stå i romtemperatur i 5 minutter for å øke elueringseffektiviteten.
Ekstraksjon for å oppnå lavt utbytte genomisk DNA
1. Prøven er feil lagret eller lagret for lenge, noe som resulterer i nedbrytning av genomisk DNA.
Anbefaling: Oppbevar vevsprøver ved -20℃;prøve å bruke nyinnsamlede vevsprøver for genomisk DNA-ekstraksjon.
2. Hvis mengden vevsprøver er for liten, vil det ekstraherte genomiske DNAet være mindre.
Forslag: Noen planteprøver er rike på vann, som vannplanter som alger osv., doseringen kan økes passende eller vannet kan dehydreres litt før operasjonen.
3. Prøvene ble ikke grundig malt med flytende nitrogen eller ble stående i romtemperatur for lenge etter maling.
Forslag: Den flytende nitrogenmalingen må være tilstrekkelig, og prøvecelleveggen bør brytes så mye som mulig;umiddelbart etter malingen skal prøvepulveret overføres til 65℃forvarmet buffer PL1 for neste trinn.
4. Bruker ikke riktig sett.
Anbefaling: Bruk et dedikert plante-DNA-isolasjonssett for å ekstrahere og rense plantegenomisk DNA.
5. Feil oppbevaring av Foregene Protease resulterer i redusert eller inaktivert aktivitet.
Anbefaling: Bekreft lagringsbetingelsene for Foregene Protease eller erstatt den med en ny Foregene Protease for enzymatisk hydrolyse.
6. Elueringsproblem
Anbefaling: Vennligst bruk Buffer EB for eluering;hvis du bruker ddH2O eller andre elueringsmidler, sørg for at pH i elueringsmidlet er mellom 7,0-8,5.
7. Elueringsvæsken dryppes ikke riktig
Forslag: Legg elueringsdråpen til midten av silikamembranen og la den stå i romtemperatur i 5 minutter for å øke elueringseffektiviteten.
8. Elueringsvolumet er for lite
Forslag: Vennligst bruk eluenten for genomisk DNA-eluering i henhold til instruksjonene, minst ikke mindre enn 100μl.
Ekstrahert genomisk DNA med lav renhet
Den lave renheten til genomisk DNA vil føre til feil eller dårlig effekt av nedstrøms eksperimenter, slik som: enzymet kan ikke kuttes, og målgenfragmentet kan ikke oppnås ved PCR.
1. Diverse proteinkontaminering, RNA-kontaminering.
Analyse: Buffer PW ble ikke brukt til å vaske kolonnen;Buffer PW ble ikke brukt til å vaske kolonnen med riktig sentrifugeringshastighet.
Forslag: prøv å sikre at det ikke er noen nedbør i supernatanten når supernatanten føres gjennom kolonnen;sørg for å vaske rensekolonnen med Buffer PW i henhold til instruksjonene, og dette trinnet kan ikke utelates.
2. Urenhet ionforurensning.
Analyse: Buffer WB-vaskekolonnen ble utelatt eller bare vasket én gang, noe som resulterte i gjenværende ionisk forurensning.
Anbefaling: Sørg for å vaske to ganger med Buffer WB i henhold til instruksjonene for å fjerne restioner så mye som mulig.
3. RNase-kontaminering.
Analyse: Eksogen RNase legges til bufferen;feil vaskeoperasjon i Buffer PW vil resultere i gjenværende RNase og påvirke nedstrøms RNA eksperimentelle operasjoner, slik som in vitro transkripsjon.
Forslag: Foregene-seriens nukleinsyreekstraksjonssett kan fjerne RNA uten ekstra RNase, og alle reagenser i Plant DNA Isolation Kit trenger ikke RNase;sørg for å vaske rensekolonnen med Buffer PW i henhold til instruksjonene, og dette trinnet kan ikke utelates.
4. Etanolrester.
Analyse: Etter vask av rensekolonnen med buffer WB ble det ikke utført sentrifugering av tomme rør.
Anbefaling: Følg instruksjonene for riktig sentrifugering av tomme rør.
Bruksanvisningen:
Bruksanvisning for plante-DNA-isolasjonssett
