Bygge SOP System
Etabler PCR-eksperiment-SOP for å standardisere oppførselen til eksperimentpersonell.
Eksperimentørene følger strengt driftsprosedyrene, og minimerer PCR-forurensning som kan være forårsaket av menneskelige faktorer eller forhindre forekomst av forurensning i operasjonen.I tillegg bør eksperimentatoren ha tilsvarende faglig kunnskap og ferdigheter, inkludert ferdigheter i å betjene relatert utstyr, klargjøre hele arbeidsprosessen, beherske behandlingsmetodene for kontaminering og laboratoriekvalitetskontrollmetoder, og være i stand til å tolke testresultatene korrekt.
Building Standard PCR Laboratory
PCR-laboratoriet er i prinsippet delt inn i fire områder, nemlig reagensforberedelsesområde, prøvebehandlingsområde, amplifikasjonsområde og amplifikasjonsproduktanalyseområde.De to første områdene er pre-amplifikasjonsområder, og de to siste områdene er post-amplifikasjonsområder.Pre-amplifikasjonssonen og post-amplifikasjonssonen bør være strengt atskilt.Eksperimentelle materialer, reagenser, registreringspapir, penner, rengjøringsmidler osv. kan bare strømme fra pre-amplifikasjonsområdet til post-amplifikasjonsområdet, det vil si fra reagensprepareringsområdet, prøvebehandlingsområdet, amplifikasjonsområdet og amplifikasjonsproduktanalyseområdet, og må ikke flyte i motsatt retning.Luftstrømmen i laboratoriet bør også strømme fra pre-amplifikasjonsområdet til post-amplifikasjonsområdet, ikke i motsatt retning.
Reduser eksperimentelle trinn
Dersom laboratoriet kun utfører PCR-deteksjon og identifikasjon, anbefales det å bruke fluorescerende kvantitativ PCR i stedet for konvensjonell PCR.
Fluorescens kvantitative PCR-deteksjonsresultater kan samles inn og analyseres med fluorescerende signaler, så det er ikke nødvendig å åpne lokket for elektroforese etter reaksjonen, noe som unngår forurensning av PCR-produkter forårsaket av lekkasje av reaksjonsprodukter for å danne aerosoler.Hvis du øker antall hetteåpninger under påfyllingstrinnet for gelelektroforese, vil det sannsynligvis oppstå aerosolforurensning.Det anbefales å fremme bruken av kvantitativ PCR og gradvis erstatte kvalitativ PCR.
Vedta UNG anti-forurensningssystem
UNG anti-PCR-produktkontamineringssystem brukes til PCR-reaksjonen.
Systemet bruker dUTP i stedet for dTTP.Etter PCR-reaksjonen blir alle PCR-produkter (DNA-fragmenter) inkorporert med dUTP;i neste runde med PCR-reaksjon, inkuberes UNG-enzymet tilsatt til systemet ved 37°C i 5 minutter før PCR, som kan være spesifikt. Degrader alle DNA-fragmenter som inneholder dUTP, og utfør deretter PCR-reaksjon.Dette kan fullstendig fjerne aerosolforurensning forårsaket av PCR-produkter.Effekten er vist i figuren nedenfor:
Merk: For direkte PCR-serien kan du velge serieproduktene til anti-PCR-produktforurensningssystemet til FJ Biotech
Foreslå
For laboratorier som utfører storskala genotypetesting, anbefales det sterkt å bruke UNG anti-PCR-produktkontamineringssystem for testing av reagenser i tillegg til bygging av rimelige laboratorier.
Påminnelse: Bruken av dette systemet kan ikke fjerne PCR-produktforurensning som allerede er forårsaket.Derfor bør UNG-systemet brukes i begynnelsen av den relevante testen, og UNG-systemet bør alltid brukes til PCR-amplifisering, for å forhindre kontaminering av PCR-produkter.Falsk positiv.
Det anbefales å bruke Direct PCR-UNG-systemet til Forge Biotech når du utfører storskala testing, slik som: Plant Leaf Direct PCR Kit-UNG;
Plant Seed Direct PCR Kit-UNG;
Animal Tissue Direct PCR Kit-UNG;
Mouse Tail Direct PCR Kit-UNG;
Zebra Fish Direct PCR Kit-UNG.
Denne serien med sett fra Foregene kan ikke bare utføre PCR-deteksjon raskt og i stor skala, men også effektivt forhindre og kontrollere PCR-produktkontaminering.
Innleggstid: 30. juli 2021