Bruker du fortsatt Trizol for å trekke ut RNA?
Jøss, ikke la meg bekymre meg for helsen din!
Trizol er i ferd med å bli marginalisert, ikke si at du fortsatt er i mørket?

Hovedkomponenten i Trizol-reagens er fenol, og organiske reagenser som kloroform tilsettes også i den eksperimentelle operasjonen.Langvarig eksponering vil skade helsen din, spesielt direkte hudkontakt kan forårsake alvorlige kjemiske brannskader og permanente arr.

Under normale omstendigheter kan laboratoriepartnerne bare redusere farene ved å bevæpne seg fullstendig (iført laboratoriefrakker, hansker og masker).

Og mitt råd til deg er: Vennligst bytt ut Trizol direkte for å unngå skade fra kilden.

1. Første generasjons produkt av RNA-ekstraksjon
Kom ut i 1987 (Trizol-reagenser)

fordel:
Mer komplett utvinning

Ulemper:
Giftige reagenser som guanidin isotiocyanat-fenol-kloroform er nødvendig;
tungvint drift;
Trenger å bruke DNase for å fjerne DNA-forurensning

2. Andre generasjons produkt av RNA-ekstraksjon
Kom ut i 1994 (QIAGEN RNeasy og de fleste innenlandske produkter)

fordel:
Kolonnesentrifugalmetoden er vedtatt, som er enkel å betjene;

Ulempe:
Må sentrifugere for å fjerne vevsrester
Trenger å bruke DNase for å fjerne DNA-forurensning

3.Tredje generasjons produkt av RNA-ekstraksjon
Kommer ut i 2005 (QIAGEN RNeasy Plus og ForegeneRNA-renseprodukter)

fordel:
Bruk DNA-fjerningskolonnen direkte for å fjerne DNA og vevsrester samtidig, noe som sparer tid og krefter;
Trygg og praktisk, ingen grunn til å legge til filterkolonne og DNase for enkelt å fjerne urenheter og unngå DNA-kontaminering

La oss se på de operasjonelle forskjellene mellom førstegenerasjonsproduktet (Trizol), andregenerasjonsproduktet (RNeasy) og tredjegenerasjonsproduktet (Foregene) av RNA-ekstraksjon:

Operasjonen i figuren er tydelig: tredjegenerasjonsproduktet har åpenbare fordeler

Bare tre ord for å beskrive: enkelt!Fort!Sikkerhet

PK-diagrammet over de eksperimentelle resultatenetilførstegenerasjons-, andregenerasjons- og tredjegenerasjonsprodukter av RNA-ekstraksjon:

1. Eelektroforetogram

Den første generasjonen (1: Trizol)
Den andre generasjonen (2:QIAGEN RNeasy)
Tredje generasjon (3: QIAGEN RNeasy plus, 4: Foregene)

Hva slags produkt som er bra, vet du ved sammenligning
RNA ekstrahert ved hjelp av Foregene-settet
Ikke bare høy konsentrasjon, men også god integritet

2.qPCR-graf (amplifikasjonskurvegraf)

Den første generasjonen (Trizol)

Den andre generasjonen (himmelblåmidlerQIAGEN RNeasy-, rødmidlerQIAGEN RNeasy +)

Den tredje generasjonen (blå betyr Foregene, grønn betyr QIAGEN RNeasy plus)

(Merk: Den andre generasjons QIAGEN RNeasy of qPCR-grafen betyr at settet ikke legger til DNase og ikke fjerner DNA-kontaminering. Derfor er CT høyere og resultatet ikke nøyaktig; QIAGEN RNeasy + betyr at DNase er tilsatt og DNA-kontamineringen er fjernet, og resultatet er nøyaktig)

Enten det er et elektroforetogram eller en kvantitativ PCR-amplifikasjonskurvegraf, er kvaliteten på Foregene-produktene ikke dårligere enn utenlandske importerte produkter.