Introduksjon:

RNA, vitenskapelig navn ribonukleinsyre, dens forkortelse kommer fra RiboNukleinsyre, er en type nukleinsyre dannet ved å koble minst dusinvis av ribonukleotider gjennom fosfodiesterbindinger.

Forutsetningen for å utforske RNA er å trekke ut forurensningsfritt totalt RNA, og det grunnleggende prinsippet for RNA-ekstraksjon kan grovt oppsummeres som følger:

1. Forstyrr cellene først

2. Fjern deretter makromolekylære urenheter (proteiner, lipider, DNA, etc.)

3. Til slutt utfelles RNA mens salter og organiske løsemidler fjernes, og RNA renses ytterligere

Fortid og nåtid av utvinningsmetode

Den første generasjonen av RNA-ekstraksjonsmetoden er TRIzol-utfellingsmetoden (reagenser som brukes inkluderer guanidin-isotiocyanat, fenol, kloroform, etc.) oppfunnet av en bestefar ved navn Piotr Chomczynski og bestemor Nicoletta Sacchi, fordi denne oppfinnelsen tillater RNA-ekstraksjon Rask og enkel, siden da startet RNA-forskningen.

Senere solgte bestefar dette patentet til Invitrogen, og Invitrogen promoterte denne metoden til verden og ble en mye brukt metode.

Senere ble Invitrogen kjøpt opp av Thermo!

Representativt produkt: Invitrogens TRIzol-reagens

Imidlertid krever TRIzol-utfellingsmetoden multippel utfelling og ekstraksjon av RNA, og reagensene som brukes er giftige og tar lang tid å operere.

Derfor ble den andre generasjons kolonne-enzym-rensemetoden til, ved å bruke silikagelmembran som et spesifikt nukleinsyreadsorpsjonsmateriale for å maksimere gjenvinningen av RNA i prøven mens andre urenheter fjernes.

Andregenerasjonsmetoden forenkler operasjonen på grunnlag av stabil ytelse, reduserer risikofaktoren og forbedrer effektiviteten av RNA-ekstraksjon.

Representative produkter: QIAGEN RNeasy og de fleste innenlandske produkter

Imidlertid krever både den første og andre generasjonsmetoden bruk av DNase for å fjerne DNA-forurensning, noe som medfører noen ulemper for påfølgende nedstrømseksperimenter.Resterende DNase vil redusere effektiviteten av revers transkripsjon og redusere første-strengs cDNA-syntesen, og dermed påvirke nøyaktigheten av resultatene.

Derfor er tredje generasjons utvinningsmetode optimalisert på grunnlag av andre generasjon.Eksperimentet trenger ikke tilsette noen enzymer, og RNA kan enkelt oppnås med bare to kolonner.

Kolonne 1: DNA-rensekolonne for å fjerne DNA

Kolonne 2: Kun RNA-kolonne adsorberer og gjenvinner spesifikt RNA

En slik enkel operasjon sparer ikke bare tid, men letter også driften av nedstrøms eksperimenter!

Representative produkter: QIAGEN RNeasy Plus ogForegeneRNA rensing produkter

（RNeasy Plus）

(ForegenesPlant Total RNA Isolation Kit）

Fortell deg det stille!Foregenes RNA-sett presenterer også et superenkelt å bruke RNase Eraser, som fullstendig kan fjerne 400μg RNase på den faste overflaten på 1 minutt, uten å tilføre noen giftige stoffer til menneskekroppen!

Bilde1: Sammenligningsskjema for operasjonelle prosesser

Foregenes produkter kan fullføre RNA-ekstraksjon på bare to sanger, ikke gjør andre sjalu på eksperimentets fremgang!

Bilde2:Eeksperimentelle resultater sammenligningsdiagram

Den første generasjonen (1: TRIzol)

Den andre generasjonen (2: RNeasy of QIAGEN)

Den tredje generasjonen (3: QIAGENs RNeasy plus, 4: Foregene)

Bilde3: qPCR-graf (amplifikasjonskurvegraf)

Den første generasjonen (grønn betyr TRIzol -, rød betyr TRIzol +)

Den andre generasjonen (himmelblå betyr QIAGEN RNeasy-, rød betyr QIAGEN RNeasy +)

Den tredje generasjonen (blå betyr QIAGEN RNeasy plus, grønn betyr Foregene)

(Merk: qPCR-graf "-" indikerer at DNase ikke er tilsatt og DNA-kontaminering ikke er fjernet. Derfor er CT høyere og resultatet ikke nøyaktig; "+" indikerer at DNase er tilsatt og DNA-kontaminering er fjernet, resultatet er nøyaktig)

Hver teknisk oppgradering gjør at driften av eksperimentet utvikler seg i en enklere og mer brukervennlig retning.

Foregene har som mål å hjelpe flere vitenskapelige forskere med å spare eksperimentell tid og kostnader, oppnå eksperimentelle resultater av høy kvalitet og i fellesskap skape mer verdifulle vitenskapelige forskningsprestasjoner.