Lnc-RT Heroᵀᴹ I (Med gDNase) (Super Premix for første-strengs cDNA-syntese fra lncRNA)
Spesifikasjoner
25×20μl Rxns, 50×20μl Rxns
Lnc-RT HeroTM I (Med gDNase) er et revers transkripsjonssystem spesielt utviklet for lncRNA for raskt å fjerne genomisk DNA-kontaminering.5×gDNase Mix kan raskt fjerne det gjenværende genomet i RNA ved 42 °C i 2 minutter, og effektivt unngå interferens av genomet på qPCR-resultater.
5×L-RT HeroTM Mix inneholder Foregene LncRNA Reverse Transcriptase spesielt utviklet av Foregene, som er en ny type revers transkriptase spesifikt for lncRNA og andre lange RNA-kompleksmaler, med sterkere RNA-affinitet og høyere reverseringsregistreringseffektivitet.Det optimaliserte systemet gjør omvendt transkripsjonshastighet raskere og kan enkelt transkribere RNA-maler med høyt GC-innhold og kompleks sekundærstruktur.Syntesen av første streng cDNA kan fullføres ved 42°C på 15 minutter.
Komponenter i sett
| 5× gDNase-blanding |
| 5× L-RT HeroTM Mix |
| RNase-fri ddH2O |
| Bruksanvisning |
Egenskaper og fordeler
■Effektiv evne til å fjerne gDNA, som kan fjerne gDNA i malen innen 2 minutter.
■ Den kan effektivt reversere transkripsjon av lncRNA.Når revers transkripsjonsproduktet utsettes for qPCR, er Ct-verdien lavere enn for konvensjonelt revers transkripsjonssystem.
■ Effektivt revers transkripsjonssystem, det tar bare 15 minutter å fullføre syntesen av det første streng-cDNA.
■ Komplekse maler: maler med høyt GC-innhold og kompleks sekundærstruktur kan også reverseres med høy effektivitet.
■ Høyfølsomt omvendt transkripsjonssystem, pg-nivå maler kan også få høykvalitets cDNA.
■ Det omvendte transkripsjonssystemet har høy termisk stabilitet, den optimale reaksjonstemperaturen er 42℃, og den har fortsatt god omvendt transkripsjonsytelse ved 50℃.
Påføring av sett
lncRNA relativ kvantitativ analyse.
lncRNA absolutt kvantitativ analyse.
Den kan raskt og nøyaktig analysere spor-RNA som RNA-virus.
Omvendt transkripsjon av RNA-maler med høyt GC-innhold eller kompleks sekundærstruktur.
Arbeidsflyt
Lagring og holdbarhet
Settet bør oppbevares ved -20°C. Oppbevar produktet i et kjøleskap med konstant temperatur ved -20°C umiddelbart etter mottak.Hvis lagringsforholdene er hensiktsmessige, vil ikke produktet forringe ytelsen i løpet av 1-års gyldighetsperiode.
Veiledning for problemanalyse
The following is an analysis of the problems that may be encountered in the use of Lnc-RT HeroTM I (With gDNase) series kits, hoping to be helpful to your experiments. In addition, we have dedicated technical support to help you with other experimental or technical problems beyond the operating instructions and questions. If you have any needs, please contact us: 028-83361257 or E-mail: Tech@foregene.com.
Non-spesifikk forsterkning
1. Urimelig primerdesign
Anbefaling: Design primere etter primerdesignprinsipper.
2. Genomrester.
Forslag: Sørg for at det første trinnet i reaksjonstemperaturen for gDNA-fjerning er 42 °C, og at reaksjonstiden også kan forlenges til 5 minutter.
Ingen forsterkningssignal ved RT-qPCR
1. RNA brytes ned.
Anbefaling: Materialet for RNA-ekstraksjon bør være så ferskt som mulig, og RNA av høy kvalitet og høy renhet bør brukes.
2. RNA inneholder hemmere.
Anbefaling: Revers transkripsjonshemmere inkluderer generelt SDS, guanidinsalter, EDTA osv. Det anbefales å vaske RNA-bunnfallet med 70 % etanol for å fjerne inhibitorene.
3. Primer design problemer.
Anbefaling: I henhold til primerdesignprinsippet, redesign primerne for inspeksjon.
Målbåndet vises i den tomme kontrollen
1. Forurensning av driftsverktøy eller reagenser.
Anbefaling: Alle reagenser eller utstyr for eksperimentet bør autoklaveres.Vær forsiktig og skånsom ved håndtering for å forhindre at DNA-prøver suges inn i pipetten eller søles ut av sentrifugerøret.
2. Kontaminering skjedde under fremstillingen av PCR-reaksjonssystemet.
Anbefaling: Ta nødvendige forholdsregler ved håndtering, for eksempel: bruk av latekshansker, bruk av filterspisser.Bruk Real Time PCR Mix i et forurensningssikkert system.
3. Primerne brytes ned.
Forslag: Bruk SDS-PAGE-elektroforese for å oppdage om primerne er degradert, og erstatt med nye primere for fluorescensdeteksjonseksperimenter.
Bruksanvisningen:
Lnc-RT HeroTM I(Med gDNase)(Super Premix for første-tråds cDNA-syntese fra lncRNA) Bruksanvisning
